캐나다 농업-농식품연구소의 Singh와 동료들은 sodium sulphite를 첨가하면 많은 양의 바이러스 RNA를 보다 쉽고 깨끗하게 분리할 수 있으며 역전사중합반응법(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)에 의한 바이러스 검출감도도 증가시킬 수 있다"고 Virological Methods지 최근호에 발표하였다.
RT-PCR법은 바이러스 검출감도와 특이도가 매우 높기 때문에 식물체에서 농도가 낮은 바이러스의 검출과 영양번식법에 의해 증식되는 식물의 바이러스 검출에 주로 이용된다.
RT-PCR법의 특이도를 감소시키는 요인 가운데 폴리페놀류의 존재유무와 농도는 RNA 추출에 사용하는 식물의 종류와 부위에 따라 다양하게 나타난다. 따라서 폴리페놀류의 활성을 감소시키기 위한 다양한 방법이 개발되었으며, 목본류에서는 설탕, bovine serum albumin, polyvinylpyrrolidone(PVP) 10 , 아스코빅산,
2-mercaptoethanol, sodium sulphite, sodium dodecyl sulphate 등이 폴리페놀류의 활성을 감소시키는데 효과가 있다고 알려져 있다. 또한 초본류에서는 Sephadex-G 50 column를 통해 RNA를 분리하거나 PVP 40, 0.85% NaCl을 함유한 인산과 시트릭산을 핵산추출용 완충액에 첨가한 경우 효과가 있다고 한다.
Singh와 동료들은 폴리페놀류를 과량으로 함유하고 있는 감자와 체리에서 바이러스 RNA를 보다 쉽고 깨끗하게 분리하기 위하여 sodium sulphite의 첨가 효과를 조사하였다. 그들은 0.65-0.70%의 sodium sulphite를 RNA 추출용 완충액에 첨가했을 때 상용 RNA 분리 키트 보다 2-3배 많은 양의 RNA를 손쉽고 깨끗하게 분리할 수 있다는 사실을 발견하였다.
(소스: Journal of Virological Methods 99 (2002) 123-131)
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